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01.細胞貼壁能力比較弱

02.細胞本身偏嗜酸性，培養(yǎng)基消耗較快

03.細胞生長時聚集成島

04.細胞聚集成團之后很難再吹散

01.細胞凍存

02.細胞傳代

03.細胞復蘇

01.細胞密度如何計算

02.培養(yǎng)過程中細胞碎片較多

• 細胞內的黑色顆粒是細胞外分泌泡以及細胞器的折光，這個屬于細胞自身特性，無法清除也無法改變。而細胞對培養(yǎng)環(huán)境不適應、缺乏營養(yǎng)、滲透壓有異常等均可能導致細胞內顆粒增加，建議適當改變培養(yǎng)條件。
• 細胞外的黑色顆粒為細胞碎片和細胞代謝產物，需要先舍棄原有培養(yǎng)基后用PBS潤洗清除細胞碎片，加入新的培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)。
  如果潤洗無法清除細胞碎片，可以等細胞密度處在70-80%左右時消化處理細胞，終止消化之后混勻細胞，收集細胞懸液在900-1000rpm條件下離心3分鐘，舍棄上清液。重懸細胞→離心→再重懸后將細胞懸液接種到新的培養(yǎng)瓶。
  第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果碎片很多，建議用PBS多次潤洗細胞。

03.細胞出現聚團現象

• 細胞傳代過程中需要盡可能地吹散細胞，并在顯微鏡下確認細胞基本分散后再把細胞接種到培養(yǎng)瓶中。
• 優(yōu)質的培養(yǎng)體系能有效避免細胞吹散后在貼壁時再聚團的現象， 也可以減輕細胞聚團后無法重新攤開生長的癥狀。
• 培養(yǎng)過程中輕微聚團可以稍微延長消化時間，讓大團細胞塊下沉后吸取上層的分散細胞進行傳代。若聚團過于嚴重建議重新培養(yǎng)或者更換培養(yǎng)體系。